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Kit de detección de ADN de micoplasma (PCR-Método de sonda de fluorescencia) [HYM002]
Código de producto: HYM002
Especificación: 50 pruebas/kit
Límite de detección: 10 UFC/mL
Descripción general del producto
El kit de detección de ADN de micoplasma (método de sonda de fluorescencia PCR-) se utiliza junto con el kit de extracción y purificación de muestras de ADN de micoplasma (método de perlas magnéticas) para detectar la presencia de contaminación por micoplasma en bancos de células maestras, bancos de células de trabajo, lotes de semillas de virus, sobrenadantes de cultivos celulares o muestras de suspensiones celulares y otros productos biológicos.
Este kit utiliza tecnología qPCR de sonda fluorescente con cebadores y sondas diseñados para fragmentos de genes de micoplasma conservados. Según los resultados del alineamiento de secuencias, permite la detección cualitativa de aproximadamente 200 especies de micoplasmas. El ensayo demuestra una alta especificidad y no se observa reactividad cruzada-para bacterias estrechamente relacionadas con el micoplasma (p. ej.,Escherichia coli, clostridio, Estreptococo) o células de ingeniería comunes como CHO, VERO y HEK293. Validado de acuerdo con los requisitos de detección de micoplasmas de EP 2.6.7, JP XVIII y USP.<77>, el límite de detección alcanza 10 UFC/mL, cumpliendo con los requisitos de sensibilidad de EP 2.6.7 para métodos NAT como alternativa a los métodos de cultivo.
Rendimiento del producto
Especificidad
La posible interferencia de medios básicos comunes, PBS, suero fetal bovino y medios de micoplasma comunes en matrices de muestras de prueba, así como células, bacterias y hongos que pueden tener reacciones cruzadas-con el ADN de micoplasma, no afecta el método de detección.
Límite de detección (LOD)
| Nombre del kit de reactivos Nombre de la cepa | Cepa UFC/mL | Tasa positiva (positiva/total) |
| Micoplasma oral | 1 | 100%(24/24) |
| micoplasma neumonía | 1 | 100%(24/24) |
| Mycoplasma hyorhinis | 3 | 100%(24/24) |
| Micoplasma arginini | 0.1 | 100%(24/24) |
| Micoplasma gallisepticum | 0.1 | 100%(24/24) |
| Mycoplasma laidlawii | 0.1 | 100%(24/24) |
| Micoplasma fermentantes | 0.1 | 100%(24/24) |
| Micoplasma salivario | 0.1 | 100%(24/24) |
| Micoplasma sinoviae | 1 | 100%(24/24) |
| espiroplasma | 0.5 | 100%(24/24) |
Estabilidad
| Proyectos de estudios de estabilidad | Detalles |
| Estabilidad de congelación-descongelación | Después de 5 ciclos de congelación-descongelación del kit, RSD <5 %, lo que indica que no hay ningún impacto significativo en los resultados experimentales. |
| Estabilidad acelerada | El kit se colocó en una incubadora a 37 grados y se probó los días 5, 7, 18 y 30. Los valores de RSD fueron todos < 5 %. |
| Estabilidad entre-lotes | Se probaron dos lotes de kits diferentes en paralelo, lo que arrojó resultados negativos constantes y valores de RSD para controles positivos e internos dentro del 5 %. |
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